寻觅差别表现基因的办法除开DDRT-PCR以外,还有减杂交(subhybridization,SH)、制约性差减杂交(suppression su变态ractive hybridiza-tion, SSH)、RNA随机引物PCR(RNA-arbitrarily primed PCR, RAP-PCR)、代表性差别剖析(representational difference analysis, RDA)、DNA微阵列(DNA Microarray,或DNA芯片)和基因表现系列剖析(serial analysis of gene expression, SAGE)等。据美国Medline 1999年十二月的调查,用以上办法来克隆差别表现基因的文章总计1810篇,那里面有67%是认为合适而使用DDRT-PCR技术[2],由此可见实际上用性和广泛性。DDRT-PCR的长处可赅括为3SRV(simplicity,sensitivity,speed,reproducibility,versatility)[3]:
①简单,技术上仅只有赖PCR和DNA测序胶电泳;
②可以同时候析多组样品;
③锐敏性高,仅需0.2μg总RNA作为开始材料,可检出低丰度mRNA;
④实验周期短,约8d即可完成,易于重复;
⑤最冒尖的长处是实验过程中可步步证验比较;
⑥可施行多基因亲族的表现剖析。?
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