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->对PCR扩增加产量物剖析 |
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1、凝胶电泳剖析
PCR产物电泳，EB溴乙锭染色紫外仪下仔细查看，开始阶段的判断产物的特别优异性。PCR产物断片的体积应与预计的完全一样，尤其是多重PCR，应用多对引物，其产物片段都应合乎预讦的体积，这是最低限度条件。石花胶糖凝胶电泳一般应用1～2百分之百的石花胶糖凝胶，供检验测定用；聚丙烯酰胺凝胶电泳时，6～10百分之百聚丙烯酰胺凝胶电泳离合效果比石花胶糖好，条带比较集中，可用于科学研究及检验测定剖析。
酶切剖析：依据PCR产物中限止性内切酶的位点，用相应的酶切、电泳离合后，取得合乎理论的断片，此法既能施行产物的鉴定，又能对靶基因分型，还能施行异样变化性研讨。
2、分子杂交
3、Southern印迹杂交：在两引物之间另合成一条寡核苷酸链(内里寡核苷酸)标记后做探针，与PCR产物杂交。此法既可作特别优异性鉴定，又可以增长检验测定PCR产物的锐敏度，还可知其分子量及条带式样，主要用于科学研究。
4、斑点杂交： 将PCR产物点在硝镪水纤维素膜或尼膜薄膜上，再用内里寡核苷酸探针杂交，仔细查看有无着色斑点，主要用于PCR产物特别优异性鉴定及异样变化剖析。
5、核酸序列剖析：是检验测定PCR产物特别优异性的最靠得住办法。
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